对于基因治疗类风湿的展望

　　在1996年，FDA批准了第一个基因治疗的人体研究。参加研究的对象为9例患有RA的绝经后妇女，她们都预备进行数个MCP关节的全关节置换手术。第一次手术从她们关节中得到各自的滑膜组织，从中提掏出成纤维细胞并在体外培养。这些细胞被分成两组，一组被逆转入IL-1Ra cDNA，另一组保持原样。在经由安全测试后，分别将这些细胞打针到原先患者的MCP关节内，每个患者都有两个关节打针处理过的成纤维细胞，另外两个关节打针没有被转人的成纤维细胞。一周后计划中的第二次手术分别掏出关节内的滑膜组织。体外分析表明，滑膜组织中成功地进行了基因转移和表达，在关节内基因的产物具有生物学活性。因为试验的时间很短，临床上并没有产生关节炎症状的改善。

　　已经在动物模型中试验过的抗关节炎蛋白质有:IL-IRa, sTNF-R, TGF-(31, vIL-10, sIL-1R,FasL,IL-13和IL-4。在将人类 RA滑膜细胞和正常软骨细胞移植到SCID小鼠的模型中发现，滑膜细胞使软骨退变有两种机制:一种是滑膜细胞直接腐蚀，另一种是滑膜细胞激活软骨细胞介导的软骨溶解。使用逆转录病毒将IL-1Ra的cDNA导人其中，可以按捺软骨细胞介导的软骨溶解，不影响滑膜的腐蚀。而将IL-10或vIL-10基因导人将按捺滑膜细胞对软骨的腐蚀，不影响软骨细胞介导的软骨溶解。

　　另一种方法是肌注编码抗关节炎蛋白的裸DNA。尽管通过这种途径基因表达的水平不高，但是基因表达持续的时间较长。最近报道，通过肌注编码TGF-(3的cDNA可以减轻鼠的链球菌细胞壁诱导的关节炎的病情流动性。在鼠足垫中打针编码IL-10的cDNA也可以按捺胶原诱导的关节炎。

　　在RA动物模型实验中，将编码sTNFR和vIL-10的腺病毒载体系统性导人也显示了改善关节炎的能力。尽管几天后，在外周轮回中就已经检测不到转基因产物，其抗关节炎的效果可以持续更长时间。在这种情况下，值得留意的是，为产生明显的抗关节炎作用所需要打针的腺病毒载体的数目接近于产生严峻肝炎的数目。

　　将抗关节炎基因导人脾细胞的实验带来了成功的结果。在这个实验系统中，具有胶原诱导关节炎的小鼠其脾细胞被用来将基因导人SCID小鼠中。使用编码 sTNFRI和转移生长因子队(TGF-队)基因的实验取得了较好的结果。

　　除了导人抗炎和免疫调节细胞因子的基因外，还能导人其产物可以被删除的基因。例如，将疤疹胸昔激酶基因导人，这样给予更昔洛韦就可以杀死滑膜内和滑膜附近的细胞，即利用更昔洛韦杀死与疤疹胸腺激酶基因产物结合的细胞，实际是药物性滑模切除。尽管有足足数量的正在分化的滑膜细胞可以被有效地杀死，但还不知道这种类型的“基因滑膜切除”比传统的滑膜切除具有什么长处。这种方法已经研究了多年，但是长期的结果仍是比较含糊。fas配位(fasL)基因的导人也是研究的一个方向。并且在这种情况下，被转导的滑膜细胞通过 fas受体同时具有选择性杀死关节炎相关性T淋巴细胞的能力，因此可以更有效的控制病情。T Kobayashi等发现fas相关性死亡结构域蛋白(FADD)在fas介导的滑膜细胞凋亡中起枢纽的作用。通过腺病毒在培养的RA滑膜细胞中转染FADD基因可以诱导 FADD表达的上调和凋亡。在移植了人类RA滑膜细胞的严峻联合免疫缺陷病(SCID)小鼠的关节内局部打针FADD腺病毒(Ad-FADD )，可以通过诱导凋亡消除滑膜细胞。而且这种凋亡只限于滑膜组织而不影响软骨细胞。

　　在体内，将基因导人到关节的滑膜层细胞可以通过腺病毒、AAV (adenoassociated virus).脂质体和裸DNA。使用这些载体，编码可溶性IL-1受体工(sIL-1R工)的基因在兔的胶原诱导的关节炎模型中显示了明显的抗关节炎活性。使用腺病毒局部导入病毒IL-10 (